A survey of prevalence of Trichomonas vaginalis in cases with vaginal discharge in Kütahya by classic miscroscopy and DNA hybridization

OBJECTIVE: The diagnosis of trichomoniasis, which is a parasitic disease caused by Trichomonas vaginalis trophozoites inhabiting urogenital system, can be carried out through various serologic, molecular, and microscopic means. The transmision of this parasite is caused not only by sexual activity but also shared use of underclothes, swimsuits, swimming pools, and toilets. This study explores prevalence of T.vaginalis among medical cases involving vaginal discharge in the city of Kütahya and compares diagnosis methods of DNA hybridization, and, native and stained microscopic examinations.
METHODS: For this purpose, a search for T.vaginalis was carried out in 237 patients with complaints involving vaginal discharge whose vaginal secretion specimens could be taken by a sterile cotton swab from posterior vaginal fornix during medical examinations at Dumlupinar University Faculty of Medicine Hospital, Obstetrics and Gynecology Polyclinic over the years from 2006 through 2008. Samples were analyzed by DNA hybridization test (Affirm™ VPIII, Becton Dickinson and Company, Sparks, MD), and microscopic examination of native and Giemsa stained preparations.
RESULTS: Out of 237 samples taken from patients with an average age of 40.2 (±11.4), 18 (7.6%) were found to be positive for T.vaginalis under native microscopic examination and 17 (7.2%) giemsa colored examination, whereas, Affirm™ VPIII examination positive results amounted to 19 (8%). In native microscopic examination, the existence of the parasite is found by observation of moving T.vaginalis trophozoites which had been stained in giemsa preparations. In Affirm™ VPIII examination, resulting images were observed colorimetrically through changes in coloring probs; and grouped as either positive or negative. Statistical analysis (SPSS 13.0) of data produced no meaningful difference between diagnostic methods used (p>0.05).
CONCLUSION: Prevalence of T.vaginalis among women in Kütahya is studied for the first time and 8% of them were found to be hosting the parasite. In epidemiological studies among randomly selected female subjects prevalence varied from 5 to 25%, therefore, the prevalence among all the women of the city might be higher. No meaningful difference appeared between diagnostic methods used (p>0.05). Though the diagnosis of T.vaginalis infection with the help of cultured media is acknowledged as the golden standard, the duration of exact diagnosis may extend up to a week. A faster method is needed in pregnant women to prevent maternal and perinatologic complications, and quick tests like DNA hybridization are also employed. This test has the advantage of producing results within two hours, and operability without experienced personnel and other equipment; while having the disadvantage of higher operational costs compared to microscopic and other cultured media methods.

Kütahya’da Vajinal Akıntılı Olgularda Trichomonas vaginalis Görülme Sıklığının Klasik Mikroskobi ve Nükleik Asit Hibridizasyon Yöntemleriyle Araştırılması

AMAÇ: Trichomonas vaginalis trofozoitlerinin ürogenital sistemde tutulum göstermesiyle meydana gelen paraziter bir hastalık olan trichomoniasisin teşhisi çeşitli kültür, serolojik, moleküler ve mikroskobik yöntemlerle yapılabilmektedir. Parazit sadece cinsel yolla bulaşmayıp aynı zamanda ortak kullanılan iç çamaşır ve mayo, yüzme havuzları ve alafranga tuvaletlerle de bulaşabilir. Bu çalışmada Kütahya’da vajinal akıntılı olgularda T.vaginalis’in yaygınlığı araştırılmış ve aynı zamanda teşhiste kullanılan yöntemlerin etkinlikleri de değerlendirilmeye çalışılmıştır.
YÖNTEMLER: Dumlupınar Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Polikliniğine 2006-2008 yılları arasında müracaat eden ve muayene esnasında arka forniksten steril pamuk eküvyon ile vajinal sekresyon örnekleri alınabilen 237 kadın hastada T.vaginalis araştırılmıştır. Her hasta için steril pamuk eküvyonlarla alınan örnekler DNA hibridizasyon testi (Affirm™ VPIII, Becton Dickinson and Company, Sparks, MD), nativ mikroskobik ve giemsa boyalı mikroskobik yöntemlerle incelenmiştir.
BULGULAR: Hastaların yaşı 18-53 arasında olup ortalaması 40.2 (± 11.4) olarak belirlenmiştir. İncelenen hasta numunelerinde nativ mikroskobik yöntemle 18 (% 7.6), giemsa boyalı mikroskobik incelemeyle 17 (%7.2), Affirm™ VPIII ile olan incelemede ise 19’unda (%8) T.vaginalis tespit edilmiştir. Nativ mikroskobik incelemede hareketli, giemsalı preparatlarda tespit edilerek boyanmış T.vaginalis trofozoitlerinin görülmesiyle parazitin varlığı saptanmıştır. Affirm™ VPIII ile olan incelemede parazite ait sekanslar yakalama ve renklendirme problarının renk değiştirmesiyle kolorimetrik olarak gözlenmiş ve müsbet veya menfi olarak değerlendirilmiştir. Yapılan istatistiki incelemede (SPSS 13.0) teşhis yöntemlerinin etkinlikleri arasındaki fark anlamlı bulunamamıştır (p>0.05).
SONUÇ: Kütahya’da kadınlarda T.vaginalis’in yayılımı ilk kez araştırılmış olup hastaların %8’inde parazit tespit edilmiştir. Epidemiyolojik çalışmalarda rast gele seçilen kadın populasyonundaki prevalansın %5-25 olarak kabul edilmesi nedeniyle Kütahya’daki yayılımının daha yüksek olabileceği düşünülmektedir. Kullanılan teşhis yöntemlerinin etkinlikleri arasında fark anlamlı bulunmamıştır (p>0.05). Kültür vasatları yardımıyla T.vaginalis enfeksiyonun teşhisi altın standart olarak kabul edilmekle birlikte kesin teşhis süresi bir haftaya kadar uzayabilmektedir. Gebelerde meydana gelebilecek maternal ve perinatolojik komplikasyonların erken dönemde önlenebilmesi için kısa sürede sonuç veren yöntemlere ihtiyaç duyulması nedeniyle DNA hibridizasyon yöntemi gibi hızlı testler de kullanılmaktadır. Yöntemin iki saat içerisinde sonuç vermesi, deneyimli personel ve ekipmana ihtiyaç duyulmadan çalışabilmesi avantaj, maliyetinin mikroskobik ve diğer kültür yöntemlerine göre yüksek olması da dezavantaj olarak değerlendirilmiştir.