Akut bruselloz tanısında polimeraz Zincir Reaksiyonu yöntemininin kullanımı

GİRİŞ ve AMAÇ: Bruselloz, pek çok ülkede olduğu gibi ülkemiz
için de önemli bir halk sağlığı sorunu olan zoonozdur.
Özgül olmayan şikayetler ve bulgularla seyreden
hastalığın tanısında altın standart olan kültürde
bakteriyi üretmek oldukça zor ve zaman alıcıdır.
Rutinde daha sık kullanılan serolojik yöntemlerin çapraz
reaksiyonlardan dolayı özgüllüğü düşüktür. Polimeraz
zincir reaksiyonu (PZR) gibi moleküler yöntemler pek
çok enfeksiyon hastalığı gibi brusellozun erken ve hızlı
tanısında iyi bir alternatif yöntemdir. Bu çalışmada,
bruselloz tanısında PZR yönteminin konvansiyonel
yöntemlerle karşılaştırılması amaçlandı.
YÖNTEM ve GEREÇLER: Çalışma grubu bruselloz ön tanılı 35
hasta ve 20 sağlıklı gönüllüden oluşturuldu. Hasta ve
kontrol grubundan serolojik çalışma için serum, PZR için
tam kan alınırken, hastalardan ateşli oldukları dönemde
kan kültürleri alındı. Tam kan örneklerinden elde edilen
lökosit pelletlerinden DNA izolasyonu yapıldı ve brusella
DNA’ sı in house PZR yöntemiyle tespit edildi.
BULGULAR: Hastaların Standart tüp aglütinasyon
(SAT) değeri 1 olguda 1/80 iken, diğerlerinde ≥1/160
idi. Bunların 16’sında kan kültürü pozitif bulundu.
Kontrollerin SAT değerleri negatif idi. PZR yöntemiyle
yapılan çalışmada hastaların %97’sinde pozitiflik
saptanırken kontrollerin hepsi negatif bulundu.
TARTIŞMA ve SONUÇ: Kullanılan PZR yönteminin erken ve hızlı
tanıda yüksek duyarlılıkta olduğu, bu nedenle bruselloz
hızlı ve doğru tanısı için kullanılmasının uygun olacağı
sonucuna varıldı.

Diagnosis of acute brucellosis by polymerase chain reaction technique

INTRODUCTION: Brucellosis is a zoonotic disease which is
a public health problem in our country like many parts
of the world. The illness has nonspecific symptoms
and physical signs. Bacterial culture is gold standard
in the diagnosis of brucellosis but it is difficult and
time consuming, so serologic techniques are used
routinely. But serologic techniques have low specificity
because of cross reactions. Molecular methods like
polymerase chain reaction (PCR) are good alternatives
in the early and rapid diagnosis of brucellosis, as it is in
other infectious diseases. The aim of this study was to
compare PCR method with conventional methods in the
diagnosis of brucellosis.
METHODS: The study included 35 patients and 20
healthy volunteers. Sera for serology and whole blood
samples for PCR were collected from each subject
in both groups. DNA was extracted from peripheral
mononuclear cells obtained from the blood samples and
an in house PCR assay was used to detect brucella DNA.
RESULTS: Standart tube agglutination (STA) titers of
most patients were ≥1/160, except one patient which
was 1/80. Blood cultures were positive for 16 patients.
The STA titers of all controls were negative. PCR was
positive for 97% of the patients and all of the volunteers
were negative.
DISCUSSION AND CONCLUSION: It is concluded that the tested PCR
assay has high sensitivity in the diagnosis of brucellosis
and it may be used in rapid and accurate diagnosis of
brucellosis.